医微客 - 实力见证！工业级产品——NGS文库构建试剂盒获批

实力见证！工业级产品——NGS文库构建试剂盒获批

临床医学

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整理：肿瘤资讯编辑部

来源：肿瘤资讯

目前，基于AMPLICON扩增子或者探针捕获法的建库试剂盒，其DNA投入量通常要求至少高于20ng。但由于肿瘤FFPE标本量有限或者保存不够专业，常常面临DNA投入量的限制而导致无法建库或者强行建库失败。MULI-SEQ扩增子建库试剂盒是桐树生物自主研发针对二代测序PGM与Proton平台开发设计的一款一体化文库构建试剂盒，其独特的多重PCR试剂及促连接剂组合设计使得该试剂盒操作简单、方便。更重要的是，专业的MULI-SEQ建库方案充分保证了超高的连接效率和极强的靶向扩增特异性，通过近3000例样本的测试，当样本投入量低至1ng时，文库构建靶向捕获率及均一性仍可达到95%以上，从而实现1ng投入量前提的99%建库成功率，远远超越了目前市场上其他的常规扩增子建库试剂盒。

图1 桐树生物自主研发的MULI-SEQ文库构建试剂盒获得药监局批准

图2不同投入量（40ng，10ng，1ng）构建文库无显著性差别,on-target rate≥95%

演示文稿11.png

图3不同投入量（40ng，10ng，1ng）构建文库无显著性差别,均一性≥95%

40ng

10ng

1ng

图4采用不同投入量（40ng，10ng，1ng）构建文库，其主峰均位于150bp-250bp处，组间无显著性差异

相比普通其他文库构建试剂盒， MULI-SEQ扩增子建库试剂盒主要有以下三大核心优势：

1. 起始量低：样本低至1 ng就可以完成建库，建库的成功率接近100%，数据分析后均一性≥ 95.0% ； On-target rate ≥ 95.0%。

2. 构建高质量文库：所有反应试剂均采取严格的质量控制和功能验证，确保产品的最佳质量（均一性≥ 95.0%； On-target rate ≥ 95.0%），最大程度上保证文库构建的稳定性和重复性。

3. 即用型试剂：建库试剂盒中的所有试剂均为即用型试剂，极大简化了操作过程，提高了操作效率和产量，并减少了污染和误差发生。

“此试剂盒在DNA样本投入量低至1ng时，仍能实现99%的成功建库，极大提高了针对低DNA含量样本的建库成功率”该试剂盒的研发主管张素芬女士说道，“当前，通过靶向捕获的方式进行基因位点测序已成为高通量检测领域的研究热点，该技术既能保证建库的高效性，又可避免全基因检测带来的财力浪费。在历时长达1年的深入研究中，桐树生物研发团队对试剂盒配方进行改造升级，对文库构建第一步多重PCR扩增反应与第二步消化过程进行深入研究，自主研发了基于高效多重PCR试剂及促连接剂组合的MULI-SEQ建库方案，充分保证了超高的连接效率和极强的靶向扩增特异性，成功开发了桐树生物MULI-SEQ扩增子建库试剂盒。

张素芬女士同时表示“目标序列测序文库制备通用试剂盒，经过严格的质量控制，完整的工艺改造放大，通过近3000例样本的内部测试，建库成功率达到99%以上，是真正的工业产品级建库试剂盒。”