背景

全球先天性耳聋患者约有2600万，其中60%与遗传因素相关。常染色体隐性遗传性耳聋9（Autosomal recessive deafness 9, DFNB9）由OTOF基因（表达耳畸蛋白）突变导致，占遗传性耳聋的2%~8%，这类患者通常表现为重度、极重度或完全听力损失和言语障碍。然而，临床上尚无治疗遗传性耳聋的药物。随着生物医药技术的革新和发展，基因治疗被认为是根治遗传性耳聋最有潜力的策略之一。基因治疗能够通过递送载体将具有正常功能的基因直接递送到内耳，表达功能正常的蛋白，恢复功能，从而在根本上恢复或改善耳聋患者听力。AAV1-hOTOF是一种针对DFNB9的基因治疗药物。作者前期在小鼠模型和非人灵长类动物模型中验证了该药物的相关安全性和有效性，并随后开展了临床试验。本文报告了AAV1-hOTOF在临床受试者中的安全性和有效性。

方法

在此项单中心临床试验中，入选标准为患重度听力损失至全聋，并且OTOF两个等位基因均携带突变（年龄1~18岁）。排除标准为双侧人工耳蜗植入，或体内针对AAV1的中和抗体滴度>1:2000的受试者。研究者经外耳道入路通过圆窗向受试者耳蜗内单次注射AAV1-hOTOF，将治疗后6周评估剂量限制性毒性作为主要结果（primary endpoint）。次要结果为有效性和其他安全性。研究者使用听觉诱发电位（auditory brainstem response, ABR）、多频稳态诱发电位（auditory steady-state response, SSR）和纯音测听（pure-tone audiometry, PTA）来评估受试者听力，并通过问卷和软件来评估受试者的听觉言语功能。所有分析均按照意向性分析（Intention-to -treat, ITT）原则进行。

结果

在2022年10月19日到2023年7月9日期间，425名受试者被筛选，共有6名受试者被招募入组并接受了AAV1-hOTOF基因治疗。其中低剂量组（9×10¹¹ vg）1名，高剂量组（1.5×10¹² vg）5名。在治疗前，6位受试者均为全聋，表现为平均ABR阈值> 95 dB。受试者平均年龄为4.1岁，随访时间均满26周。

AAV1-hOTOF基因治疗展示了良好的安全性和耐受性

在26周的随访时间内，6位受试者均未出现剂量依赖毒性反应或严重不良事件。低剂量组的1名受试者，共出现6个不良事件（Adverse events），均为1级或2级。高剂量组的5名受试者，共出现42个不良事件，其中40个为1级或2级，2个为3级；其中2个3级不良事件均为第5位受试者术后出现中性粒细胞降低（Decreased neutrophil count），但是2周后复查恢复正常。受试者1、2、3和5在术后4、6、13和26周前庭功能检查均未发现异常，受试者4和6因为年龄太小无法配合完成前庭功能检查。耳内镜检查发现治疗后，受试者鼓膜恢复良好。术后受试者血液中针对AAV1的中和抗体滴度上升，但qPCR未发现病毒载体分布。

表1：AAV1-hOTOF基因治疗后的不良事件

5位受试者治疗后听觉和言语功能明显好转

5位受试者在接收治疗后听觉功能恢复，并且效果随着时间的增加而更明显。其中低剂量组的第1例受试者，平均ABR阈值在4周时恢复至68 dB，13周恢复至53 dB，26周恢复至45 dB。

在高剂量组中，第2例受试者，其听力较术前相比，没有改善；第3，4，5和6例受试者的听力均有明显恢复，平均ABR阈值在术后26周分别恢复至48 dB、38 dB、40 dB和55 dB。

图1：AAV1-hOTOF基因治疗前后的受试者听力

5名受试者言语功能得到明显恢复

第1例和第3例受试者，关闭人工耳蜗后，在术前、术后4周和13周时无法识别噪声环境下的言语；然而，在术后26周，受试者噪声环境下的言语感知均有明显的提高，同时两名患者在无耳蜗的情况下能够与人流畅交流。第5例受试者在关闭人工耳蜗的情况下，术前在安静环境下无法识别言语；然而，在术后26周，受试者在安静环境下的言语能力较前明显提高，并且患者在无耳蜗的情况下能够与人正常交流。第4例和第6例受试者，由于年龄太小，均无法完成言语评估测试，但通过言语问卷和视频，可以发现患者的言语功能较术前明显提高。

解释

AAV1-hOTOF基因治疗是一种针对常染色体隐性遗传性耳聋9（DFNB9）患者的安全且有效的创新型疗法。END