第一代布鲁顿酪氨酸激酶（BTK）抑制剂伊布替尼一线治疗复发难治CLL高度有效，但出现Cys481Ser和PLCG2突变时发生继发耐药。新一代BTK抑制剂泽布替尼对初治和复发难治CLL均高度有效，研究中38例接受泽布替尼治疗患者中，4例出现疾病进展，测序检查发现均携带BTK激酶区Leu528Trp突变，同时均存在的突变还有Cys481，但频度较低。研究证实，这两个突变发生于不同等位基因（见下图），治疗前两种突变均不存在，纵向分析证实 Leu528Trp与疾病进展相关，另有3例尚未进展的患者也携带Leu528Trp ，中位出现突变时间40个月。另外对49例伊布替尼治疗患者检测未发现Leu528Trp突变。进一步研究证实Leu528Trp可导致激酶失活，但却能通过其他信号通路完成BTK酶功能。晶体结构研究证实，Leu528Trp突变影响泽布替尼与BTK的相互作用。

鉴于以上数据，Leu528Trp作为二代BTK抑制剂的特异性耐药突变，应在疾病进展时予以检测。 

门冬酰胺酶用于治疗白血病，耐药很常见，其生物学基础尚不清楚。最近发现Wnt诱导的糖原合成酶激酶3（GSK3）受抑可明显使耐药白血病恢复对门冬酰胺酶治疗的敏感性。该效应由Wnt信号的β-catenin独立分支介导，称为Wnt依赖的蛋白质稳定（Wnt/STOP），能抑制GSK3依赖的蛋白质泛素化和蛋白酶体降解。因此，门冬酰胺酶耐药白血病依赖分解代谢蛋白质作为氨基酸替代来源，以维持生存。门冬酰胺酶耐药由GSK3α选择性介导，而非GSK3β，但一直以来人们认为二者的生物功能非常相似，因此有必要确定门冬酰胺酶耐药源于选择性地依赖GSK3α活性的原因。

研究证实GSK3α的N末端与门冬酰胺酶耐药相关，该区域结构简单，易发生内源发改变，表现为液-液二相分离（见下图）。相分离允许细胞将重要的生化反应成分浓聚至无膜结构的细胞器中，从而提高催化效率。免疫荧光共聚焦显微镜显示GSK3α（而非GSK 3β）在门冬酰胺缺乏时易位至胞浆体，形成无膜的胞浆体GSK3a，胞浆体GSK3a与应激颗粒、P小体和侵袭体等已知的相分离明显不同。胞浆体GSK3a与热休克蛋白70、K48连接泛素和蛋白酶体共定位，提示与蛋白质去折叠、泛素化和降解相关。

GSK3α和HSP70缺失可以阻断胞浆体GSK3a形成，诱导门冬酰胺酶治疗敏感。进一步检测门冬酰胺酶耐药与敏感T-ALL、AML和B-ALL患者衍生的异种移植物（PDXs），发现GSK3α相分离能力与T-ALL、B-ALL和AML中门冬酰胺酶耐药程度密切相关。

慢性粒细胞白血病（CML）采用酪氨酸激酶抑制剂治疗后进展，最常见原因是激酶区（TKD）突变，目前只有泊马替尼可克服T315I耐药，治疗选择极为有限。Asciminib是ABL1的异构抑制剂，靶向ABL1激酶区的myristoyl口袋，能克服T315I耐药，但对F359耐药，其他耐药突变也多发生于myristoyl口袋残基附近，这些突变对其他作用于ATP位点的ABL1激酶抑制剂仍然敏感，将 Asciminib与其他激酶抑制剂联合能增强靶抑制作用。

本研究中采用Asciminib与泊马替尼联合治疗，对T315I复合突变体有效，可明显延长T315I复合突变体异种移植小鼠的生存，分子结构分析支持这种联合治疗的有效性（见下图）。